Modifikacija fosforilacije
Istraživanje fosforiliranih proteina i peptida može pomoći ljudima da razjasne mehanizam gore navedenog procesa i dalje razumiju prirodu životnih aktivnosti. Posljednjih godina, uz kontinuirani razvoj proteomske tehnologije, proučavanje fosforilacije proteina dobiva sve veću pozornost. Mnogi prirodni toksini i patogeni također ispoljavaju svoje učinke mijenjanjem statusa fosforilacije unutarstaničnih proteina.
Fosforilirani polipeptidi uglavnom se odnose na Ser, Tyr i Thr. Hidroksilna skupina bočnog lanca ostatka je modificirana u kiseli fosfatni polipeptid. Do sada modifikacija fosforilacije polipeptida uglavnom uključuje metodu post-fosforilacije i dvije metode sinteze:
Kada se modificira monomernom metodom, fosforilirana aminokiselina se teško kondenzira s peptidnim lancem zbog steričke smetnje uzrokovane većom modifikacijskom skupinom bočnog lanca, a naknadno uvođenje aminokiseline bit će teže. Pogotovo kada sadrži više modifikacija mjesta fosforilacije, sinteza će postati iznimno teška, a konačni proizvod ima složene komponente, teško ga je odvojiti i ima iznimno nizak prinos. Stoga, kada je više mjesta u peptidnom lancu fosforilirano, može se razmotriti metoda post-fosforilacije. Glavni proces sinteze je selektivno uklanjanje zaštitnih skupina bočnog lanca aminokiselina koje treba označiti nakon završetka sinteze polipeptida. Za Tyr, Thr aminokiseline s nezaštićenim bočnim lancima mogu se koristiti izravno za reakciju. Zaštitna skupina bočnog lanca na 1% TFA/DCM Može se kvantitativno ukloniti pod određenim uvjetima. Tijekom post-fosforilacije može se koristiti bis benzil fosforamidit. Tetrazol stvara aktivni međuprodukt fosforamidit tetrazol, koji je povezan s hidroksilnom skupinom, a zatim oksidira pod peroksikiselim uvjetima kako bi se stvorila fosforilna skupina za dovršetak reakcije.
- Pružamo usluge modifikacije fosforilacije pSer, pTyr, pThr i D-pSer, D-pTyr, D-pThr.
- Modifikacije fosforilacije 2 mjesta, 3 mjesta, 4 mjesta i 5 mjesta mogu se izvesti istovremeno.
Fosforilirani peptidi Sintetski slučaj (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) čekaj)
1. Postoje 4 mjesta fosforilacije u nizu (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), čistoća je 95%, a ciklus završetka je 3 tjedna.
